随着抗体技术的发展和进步，双抗研发呈现出良好的发展前景，有望填补当前疗法在部分适应症上的不足，近日，美迪西助力百奥泰双抗(PD-L1/CD47) 申报临床。

随着双抗技术的发展，双抗如今呈现出良好的发展前景，各大公司在布局双抗产品研发的同时，也高度关注在双抗生物分析中有哪些需要针对性加以注意和考量的法规和技术要点。美迪西生物技术药物分析部致力于为客户量身打造 Case by Case 的生物分析方法。

双抗药物发展史

50 年前，Nisonoff 及其同事提出双特异性抗体（bsAb) 的概念。随后的几十年里，研究证实了双特异性抗体能够把免疫细胞吸引到肿瘤部位并能诱导 T 细胞杀死肿瘤，为癌症治疗和诊断提供了一种新的有潜力的免疫治疗方法。截至今年7月份，已有200多种双抗药物处于临床及临床前研究阶段。

癌症中双特异性抗体的示意图：作用机制和潜在靶点[1]

双抗热门靶点介绍

双抗研发约有近百种双抗靶点联合方式。与单抗靶点选择相对较高的集中度相比，双抗靶点选择更加多元化。双抗开发数量排名前十的靶点有 CD3， PD-L1、CD47、CD20、EGFR 等。

CD3 是目前最热门的双抗靶点选择，与其他靶点联合的数量最多。除 CD3 外，双抗联合数量较多的靶点还有 PD-1、PD-L1 和 CD47。如近期，美迪西助力百奥泰的首款双特异性抗体 BAT7104 申报临床，BAT7104 便是 PD-L1/CD47 双抗。

PD-1/PD-L1 免疫检查点抑制剂的开发给癌症带来了革命性的治疗策略，一直以来都是肿瘤免疫领域的前沿研究方向，也是国内大部分创新药企开启免疫治疗领域的首选。

CD47 是一个五次跨膜蛋白, 分子量约为 45-55kDa，属于免疫球蛋白超家族成员。大部分肿瘤细胞中 CD47 呈高表达状态，如骨髓瘤、利约姆约肉瘤、白血病、非霍奇金淋巴瘤、乳腺癌、骨肉瘤和肝细胞癌；是癌症免疫逃逸的机制，属于一种新型的免疫检查点，是肿瘤免疫治疗研发的热门靶点之一。

表1：靶向 CD47 的双抗临床研究进展，截至 2021 年 3 月[1]

双抗药物市场概述

双抗药物是免疫治疗药物的重要发展方向之一。与单抗相比，双抗药物在疗效提升、副作用降低等方面具备优势，被称为“第二代”免疫治疗药物，其研发受到全球多个医药企业的关注。

双抗药物研发壁垒高，但未来市场空间广阔，因此全球进入双抗领域布局的企业正在不断增多。国外市场中，双抗药物研发企业主要有罗氏、Amgen、MacroGenics、Xencor、Genmab、阿斯利康等。国内市场中，布局双抗药物市场的企业则主要有康宁杰瑞、百济神州、岸迈生物、信达生物、康方生物、武汉友芝友、恒瑞医药、四川百利等。

在全球范围内，处于临床及临床前阶段的双抗药物有 200 余款，其中肿瘤治疗药物占据主导地位，份额占比达到 8 成左右，其他疾病治疗药物研发较少。

目前已获批上市的双抗药物有四款，分别是 Trion Pharma 的 Removab、Amgen 的 Blincyto、罗氏的 Hemlibra、Janssen 的 Rybrevant；其中 Removab 靶向 T 细胞表面抗原受体 CD3 和癌细胞标志物 EpCAM；Blincyto 靶向 CD3 和 CD19；Hemlibra 靶向 FIX 和 FX；Rybrevant 靶向 EGFR-Met。Removab 是全球首款获批上市的双抗药物，也是全球首个退市的双抗药物。Rybrevant 是 今年 5 月份 FDA 加速批准的第一个针对非小细胞肺癌的靶向治疗。目前，仅有 Hemlibra 进入国内市场。Hemlibra 主要用于治疗血友病，在疗效、半衰期、给药便利性等方面优势明显，市场需求快速放量。随着 Hemlibra 进入国内市场，双抗药物的市场认知度正在不断提高。

展望

随着双抗技术的发展，双抗如今呈现出良好的发展前景，各大公司在布局双抗产品研发的同时，也高度关注在双抗的生物分析中有哪些需要针对性加以注意和考量的法规和技术要点。

双特异性抗体是一种具有多结构域的抗体蛋白，有多个不同的结合位点，作用机制更为复杂，这些为双抗药物的分析方法的设计增加了更多的考虑点，带来了更多的复杂性，需要测量的分子形式包括 total、 free、total bound、Partial bound，这些形式的分析需要 Case by Case 的考虑。

美迪西生物技术药物分析部致力于为客户量身打造 Case by Case 的生物分析方法，并利用先进的技术平台完成优质高效的研究服务。美迪西生物技术药物分析部灵活运用ELISA、 ECL、 TRFIA、CLIA、 IF、 IP、 CoIP、 qPCR、 FACS、 ELISpot、 H-ELISA, 酶活等多种方法，支持前沿生物药如蛋白、抗体（单抗、双或多特异性抗体、抗体片段）、ADC、多肽、核酸、疫苗及细胞基因治疗等药物在早期开发、临床前和临床阶段的PK/TK/Immunogenicity (Total ADA& Nab)/Biomarker&Cytokine 等研究评价。目前已经支持多个涉及 Her2、Trop2、Muc1 等靶点的 ADC 药物，和 EGFR、PCSK9、IL-17A、 IL-6、 IL-23、VEGF、 CD47、 TNF-α、 CD20、TIGIT 等热门靶点及4-1BB、PD1、PDL-1、CTLA4等免疫检查点的单抗或多抗药物，针对不同靶点的 CAR-T、 CAR-NK，还有各融合蛋白、溶瘤病毒、核酸以及众多涉及糖尿病、心血管、骨、肿瘤等相关疾病的多肽类药物不同阶段的研究工作。

参考文献：Yan Yang, et al.Potential Role of CD47-Directed Bispecific Antibodies in Cancer Immunotherapy. Front Immunol. 2021 Jul 8;12:686031.